毛細管電泳是一種高速、高效、微量的液相分離技術(shù), 現已廣泛的應用于環(huán)境分析、藥物分析以及生命物質(zhì)的分析。檢測電泳分離后的微量化學(xué)物質(zhì)是毛細管電泳儀器發(fā)展的一個(gè)挑戰性的工作。在線(xiàn)光度檢測是最簡(jiǎn)單、通用和直接的檢測手段。毛細管作為一個(gè)薄型吸收池, 光程僅為20 ~ 100 μm , 光度檢測靈敏度較低。由朗伯-比爾吸收定律(A =εlc)可知, 光度檢測的靈敏度為εl , 提高靈敏度的直觀(guān)的方法是采用摩爾吸光系數比較大的顯色體系和增加吸收光程, 其中后者更具有普適性。目前的做法有采用泡型池 、多重反射池及軸向吸收池等 , 但是增加的光程是有限的, 并沒(méi)有完全解決這一問(wèn)題。我們提出和驗證了測量薄池光吸收的新技術(shù) , 指出在薄池吸收測量場(chǎng)合, 可以采用寬帶吸收技術(shù)來(lái)測定表觀(guān)吸光度或吸收強度, 通過(guò)提高入射光強度來(lái)提高測定的信噪比, 從而降低檢出限。為了研究寬帶吸收技術(shù)的特性和實(shí)現方式, 我們設計和制作了新型的薄池寬帶紫外光度檢測器(LBUAD), 并且對該儀器的性能進(jìn)行了測試。
性能測試結果表明, LBUAD 具有穩定的基線(xiàn), 漂移小于0 .001AU h , 對對硝基苯肼的檢出限達到10-6 mol L , 對KMnO4 系列標準溶液的測定有超過(guò)2個(gè)數量級的動(dòng)態(tài)范圍, 這些指標均達到了原設計的要求。LBUAD 沒(méi)有采用棱鏡、光柵等分光元件以及波長(cháng)選擇及調整機構, 而是用帶通紫外玻璃來(lái)得到入射寬帶光, 光學(xué)系統更加小型化、簡(jiǎn)單、緊湊。光路系統基本筒狀中心對稱(chēng), 調整方便, 光傳輸效率高。獨特的光學(xué)設計使得參比光和樣品光的能量較傳統儀器有較大的提高, 從而使光度測定的信噪比大為改善, 與DD2000 的比較, 證實(shí)了LBUAD 較好的檢測性能。