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在檢定紫外可見(jiàn)分光光度計的實(shí)踐中，有較多以棱鏡分光的儀器，在檢定它們的透射比時(shí)，在被檢的個(gè)別波長(cháng)點(diǎn)出，如果不加入儀器所配置的濾色片，則有嚴重的偏低現象，如加入濾色片則有明顯的提高，這種顯然是由于雜散光引起的異?，F象，過(guò)去人們一直因為按線(xiàn)性的檢定規程檢定時(shí)未能檢出雜散光而被忽視，因此到目前為止還沒(méi)有人對產(chǎn)生這種現象做認真仔細的分析。下面將做具體的分析，以供堵著(zhù)有一個(gè)明確客觀(guān)的認識。
理論推導：我們知道標準物質(zhì)的透射比特性曲線(xiàn)，任何一個(gè)分光系統都無(wú)法獲得單一波長(cháng)的光，比色分析中所謂的單色光是指一定光譜帶寬的光束，這事容易理解的，透射比的誤差與雜散光成正比，當雜散光一定時(shí)，T值越大，誤差表現的也越明顯。
關(guān)于加入濾色片后光譜帶寬變大的影響：為了除去雜散光，在實(shí)際檢定過(guò)程中需要進(jìn)行濾光，但加入濾光片后將減弱光強，對有些分光光度計就需要調大狹縫寬度來(lái)補償光強的減弱，使空白值調到100%T，這樣顯然會(huì )增大光譜帶寬，增大光譜帶寬不會(huì )帶來(lái)前文提及的異?，F象。實(shí)踐說(shuō)明，加入濾色片后的測得值在透射比峰值處稍低些，但基本上無(wú)明顯的變化，這與前文中的異?，F象無(wú)關(guān)，排除了異?，F象是由于加入濾色片后因帶寬增加而帶來(lái)透射比值提高的可能性。
雜散光波長(cháng)的推測及雜散光含量的估算：標準溶液選擇了235nm，257nm，313nm，350nm；紫外標準濾光片選取了270nm，293nm，350nm。主要討論標準溶液的313nm和紫外標準濾光片的350nm處，因為這兩點(diǎn)處透射率受雜散光影響時(shí)，透射率數值明顯上偏差。測定值總是偏低的，因為這兩點(diǎn)是極大值點(diǎn)，根據前述的理論推導這是不難理解的。但雜散光究竟是來(lái)自長(cháng)波方向還是短波方向，按現行的單光束紫外可見(jiàn)分光光度計檢定規程檢定方法可以查出來(lái)自長(cháng)波方向雜散光，但由于來(lái)自短波方向的雜散光則無(wú)法查出。在實(shí)際工作中，很多一起按現行規程檢測出雜散光后透射比的異?，F象仍然存在，這就說(shuō)明了還有來(lái)自短波方向的雜散光。
