紫外可見(jiàn)分光光度法是根據物質(zhì)分子對波長(cháng)在200~760nm 范圍內的電磁波的吸收特性所建立起來(lái)的一種定性、定量和結構分析方法。由于它具有靈敏度高、選擇性好、適用濃度范圍廣、準確度高、操作簡(jiǎn)便、快速、安全等特點(diǎn)。從這項技術(shù)誕生至今,廣大的科技工作者一直致力于對它的研究。近幾年來(lái),紫外可見(jiàn)分光光度技術(shù)取得了巨大的發(fā)展。本文將從以下幾方面作詳細綜述。
多組分體系的測定進(jìn)展:在分光光度分析法中,對于吸收曲線(xiàn)嚴重重疊的多組分的測定,一般是將組分分離后逐個(gè)進(jìn)行測定。近年來(lái)因計算數學(xué)的發(fā)展及計算機應用的普及而迅速發(fā)展起來(lái)的計算分光光度法,是一種不經(jīng)分離同時(shí)測定多組分體系的快速、有效的方法。
除了用計算分光光度法不經(jīng)分離同時(shí)測定多組分體系外,人們還在嘗試用計算機和紫外可見(jiàn)分光光度聯(lián)用來(lái)測定多組分體系。以Glenn的正交函數法為基礎提出的一種嶄新的數學(xué)
變化方法——褶合光譜法,它根據諧波分析原理,將光譜吸收曲線(xiàn)看作是多個(gè)數學(xué)分量加權而成的。該方法可以顯示吸收曲線(xiàn)的細微差異,減少混合體系中共存組分的數學(xué)相關(guān)性,在混合物定量方法中有明顯的優(yōu)勢。應用計算機輔助褶合光譜法,不經(jīng)分離同時(shí)測定了抗敏Ⅰ號中富馬酸酮替芬和地塞米松磷酸鈉的含量。褶合光譜法還被用于分析超臨界流體萃取選擇性。但是,褶合光譜法作為一個(gè)軟件包,對紫外可見(jiàn)分光光度計主機的要求很高,最重要的是要求儀器的雜散光、光度噪聲很小。
另外,在實(shí)際的測定過(guò)程中,有時(shí)會(huì )遇到待測組分與干擾組分的吸收峰相互重疊,樣液中共存的膠體和懸浮物影響測定的情況。導數分光光度法的出現解決了這一難題。近幾年來(lái),隨著(zhù)電子技術(shù)的飛速發(fā)展,特別是計算機的廣泛應用,導數分光光度法這一技術(shù)也得到了發(fā)展。導數分光光度法靈敏度高、分辨率好、抗干擾能力強,能將普通吸收光譜中重疊帶、肩峰和極微弱的信息分辨顯示出來(lái),達到消除干擾和測定痕量組分的目的。它還能消除樣品渾濁等背景干擾,從而大大簡(jiǎn)化了測定步驟。此方法主要應用于混合物中多組分的同時(shí)測定、微量及痕量組分的測定、異構物的鑒別等。